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外泌體nta檢測

發布時間:2024-05-09 16:55:27   來源:廣西藝景園林工程有限責任公司   閱覽次(ci)數:1668次(ci)   

由于卵(luan)(luan)巢(chao)中(zhong)(zhong)(zhong)流細(xi)(xi)胞質膜(mo)上的(de)(de)(de)磷(lin)脂酰(xian)絲(si)氨酸(phosphati[1]dylserine,PS)可(ke)(ke)以外(wai)(wai)(wai)泌(mi)(mi)體形(xing)式分泌(mi)(mi)入血(xue)(xue),惡性卵(luan)(luan)巢(chao)ai患(huan)(huan)者血(xue)(xue)漿外(wai)(wai)(wai)泌(mi)(mi)體中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)PS水平明(ming)(ming)顯高于卵(luan)(luan)巢(chao)良xing病變患(huan)(huan)者和(he)(he)健康(kang)對照者,因此外(wai)(wai)(wai)泌(mi)(mi)體中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)PS可(ke)(ke)用于協助早(zao)期卵(luan)(luan)巢(chao)惡性中(zhong)(zhong)(zhong)流的(de)(de)(de)篩查和(he)(he)診(zhen)斷。外(wai)(wai)(wai)泌(mi)(mi)體可(ke)(ke)穿透(tou)血(xue)(xue)-腦脊液(ye)屏障的(de)(de)(de)特點也為腦中(zhong)(zhong)(zhong)流患(huan)(huan)者提供了(le)早(zao)期診(zhen)斷的(de)(de)(de)重要(yao)工具。血(xue)(xue)漿微囊泡EGFRvIIImRNA已(yi)被證明(ming)(ming)可(ke)(ke)作(zuo)為膠質母細(xi)(xi)胞瘤患(huan)(huan)者診(zhen)斷的(de)(de)(de)支持證據(ju)。2020年(nian),DavidLyden和(he)(he)WilliamR.Jarnagin教授團(tuan)隊合(he)作(zuo),通過探究來(lai)自(zi)不同ai種組(zu)織(zhi)、血(xue)(xue)漿和(he)(he)其他體液(ye)的(de)(de)(de)426個人類(lei)樣品中(zhong)(zhong)(zhong)細(xi)(xi)胞外(wai)(wai)(wai)囊泡和(he)(he)顆(ke)粒(extracellularvesicleandparticle,EVP)的(de)(de)(de)蛋白質組(zu)學特征,鑒定(ding)出一批中(zhong)(zhong)(zhong)流特異性血(xue)(xue)漿EVP蛋白(特異度和(he)(he)靈(ling)敏度分別為95%和(he)(he)90%),并可(ke)(ke)區(qu)分患(huan)(huan)者的(de)(de)(de)中(zhong)(zhong)(zhong)流類(lei)型,使基于外(wai)(wai)(wai)泌(mi)(mi)體的(de)(de)(de)中(zhong)(zhong)(zhong)流診(zhen)斷和(he)(he)鑒別診(zhen)斷向前(qian)邁進了(le)一步。外(wai)(wai)(wai)泌(mi)(mi)體的(de)(de)(de)異質性可(ke)(ke)以根據(ju)其大小(xiao)、含量(載物)、對受體細(xi)(xi)胞的(de)(de)(de)功能影響以及細(xi)(xi)胞來(lai)源來(lai)區(qu)分。外(wai)(wai)(wai)泌(mi)(mi)體nta檢測(ce)

外泌體nta檢測,外泌體提取試劑盒

一類外泌(mi)(mi)體(ti)中(zhong)(zhong)常(chang)見的(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞質蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)是Rabs蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai),是鳥苷酸(suan)三(san)磷(lin)酸(suan)酶(GTPases,)家(jia)族(zu)的(de)(de)(de)一種(zhong)(zhong)。它(ta)可以(yi)調節外泌(mi)(mi)體(ti)膜(mo)與受體(ti)細(xi)(xi)胞的(de)(de)(de)融合(he),有(you)(you)文(wen)獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現于(yu)早期以(yi)及(ji)(ji)回收的(de)(de)(de)核(he)內(nei)體(ti)中(zhong)(zhong),RAB7和RAB9主要出現于(yu)晚期的(de)(de)(de)核(he)內(nei)體(ti)。現有(you)(you)大(da)量的(de)(de)(de)研究發現外泌(mi)(mi)體(ti)中(zhong)(zhong)含(han)有(you)(you)40種(zhong)(zhong)RAB蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)。除(chu)了RAB蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai),外泌(mi)(mi)體(ti)中(zhong)(zhong)富含(han)具有(you)(you)外泌(mi)(mi)體(ti)膜(mo)交換以(yi)及(ji)(ji)融合(he)作用(yong)的(de)(de)(de)膜(mo)聯(lian)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)(包(bao)(bao)括膜(mo)聯(lian)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)1、2、4、5、6、7、11等(deng))。外泌(mi)(mi)體(ti)膜(mo)上富含(han)參與外泌(mi)(mi)體(ti)運(yun)輸的(de)(de)(de)四跨膜(mo)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)家(jia)族(zu)、熱休克蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)家(jia)族(zu)。其它(ta)一些外泌(mi)(mi)體(ti)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)包(bao)(bao)括多種(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)代謝類的(de)(de)(de)酶、核(he)糖體(ti)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)(RPS3)、信號轉導因(yin)子(黑色(se)素瘤分化(hua)相關因(yin)子,ARF1,CDC42,人類紅(hong)細(xi)(xi)胞膜(mo)整合(he)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai),SLC9A3R1)、粘附因(yin)子、細(xi)(xi)胞骨架蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)(bai)(bai)以(yi)及(ji)(ji)泛素等(deng)。遼寧CD9外泌(mi)(mi)體(ti)慢(man)病毒(du)包(bao)(bao)裝(zhuang)科(ke)學家(jia)也(ye)嘗試利用(yong)外泌(mi)(mi)體(ti)的(de)(de)(de)壓制發病機制功能。

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外(wai)泌(mi)(mi)體(ti)可以由體(ti)內或體(ti)外(wai)培養(yang)的(de)(de)(de)(de)幾乎所有類型的(de)(de)(de)(de)細胞分(fen)(fen)泌(mi)(mi),并廣fan存在于(yu)血漿、膽汁、尿液(ye)(ye)、母(mu)乳、唾液(ye)(ye)、胸(xiong)腔(qiang)積液(ye)(ye)、淋巴、胃(wei)酸、支氣管肺泡(pao)灌洗(xi)液(ye)(ye)、腦脊液(ye)(ye)、眼淚、滑膜(mo)液(ye)(ye)、羊水、腹水、鼻分(fen)(fen)泌(mi)(mi)物(wu)(wu)和(he)子宮抽吸物(wu)(wu)液(ye)(ye)體(ti)等體(ti)液(ye)(ye)中(zhong)。目前,基(ji)(ji)于(yu)不(bu)同的(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)離(li)原理,研究者(zhe)建立了五種主(zhu)要的(de)(de)(de)(de)提取純(chun)化技術,分(fen)(fen)別為基(ji)(ji)于(yu)質(zhi)量(liang)密度的(de)(de)(de)(de)超速離(li)心技術、基(ji)(ji)于(yu)粒徑大小(xiao)的(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)離(li)技術、基(ji)(ji)于(yu)溶解性(xing)質(zhi)的(de)(de)(de)(de)聚(ju)合物(wu)(wu)沉淀技術、基(ji)(ji)于(yu)免疫親和(he)原理的(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)離(li)技術和(he)基(ji)(ji)于(yu)流(liu)體(ti)性(xing)質(zhi)的(de)(de)(de)(de)微流(liu)控技術。

外(wai)(wai)泌體(ti)(ti)(ti)是具有雙(shuang)層脂膜的(de)囊(nang)泡(pao)結構,其(qi)穩定(ding)(ding)性(xing)較好(hao),可保(bao)護(hu)內(nei)(nei)部生(sheng)物分(fen)子免受體(ti)(ti)(ti)液中(zhong)各種酶的(de)影(ying)響,從而保(bao)持(chi)其(qi)完整性(xing)和生(sheng)物活性(xing)。外(wai)(wai)泌體(ti)(ti)(ti)被提取后一般懸浮于磷酸鹽緩沖(chong)液。目(mu)前,常(chang)用的(de)儲(chu)(chu)存方法(fa)為冷凍(dong)保(bao)存,但是冷凍(dong)保(bao)存可能(neng)會導致外(wai)(wai)泌體(ti)(ti)(ti)形(xing)狀與物理性(xing)質的(de)改變,也(ye)可能(neng)導致多層囊(nang)泡(pao)的(de)形(xing)成和聚集,反復凍(dong)融(rong)會導致外(wai)(wai)泌體(ti)(ti)(ti)表(biao)面分(fen)子的(de)生(sheng)物特性(xing)、含量和標志物組(zu)成發生(sheng)變化。血(xue)清(qing)中(zhong)包含外(wai)(wai)泌體(ti)(ti)(ti)在內(nei)(nei)的(de)細胞外(wai)(wai)囊(nang)泡(pao)DNA在不同(tong)儲(chu)(chu)存環境(jing)可保(bao)持(chi)穩定(ding)(ding),血(xue)漿(jiang)存放于4°C時其(qi)RNA會明顯(xian)降解,在–20°C下(xia)長期保(bao)存也(ye)會導致血(xue)漿(jiang)中(zhong)外(wai)(wai)泌體(ti)(ti)(ti)總RNA降解,但miRNA卻十(shi)分(fen)穩定(ding)(ding),這(zhe)也(ye)提示了外(wai)(wai)泌體(ti)(ti)(ti)miRNA作為生(sheng)物標志物的(de)潛(qian)力。蛋白質分(fen)子在外(wai)(wai)泌體(ti)(ti)(ti)信號傳(chuan)遞過程(cheng)中(zhong)起到了非(fei)常(chang)重(zhong)要的(de)作用。

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細胞(bao)(bao)分(fen)泌(mi)(mi)(mi)(mi)外(wai)泌(mi)(mi)(mi)(mi)體(ti)(ti)的(de)過程(cheng)一(yi)般分(fen)為(wei)三個階段:(1)質(zhi)(zhi)(zhi)膜內陷,形成(cheng)早期(qi)內吞(tun)小(xiao)泡(pao);(2)內吞(tun)小(xiao)泡(pao)向內萌發成(cheng)熟(shu),形成(cheng)多囊(nang)泡(pao)體(ti)(ti);(3)多囊(nang)泡(pao)體(ti)(ti)與(yu)質(zhi)(zhi)(zhi)膜融合,并釋放出囊(nang)泡(pao)內容物(wu),形成(cheng)外(wai)泌(mi)(mi)(mi)(mi)體(ti)(ti)。外(wai)泌(mi)(mi)(mi)(mi)體(ti)(ti)具(ju)有(you)(you)獨特(te)(te)的(de)理(li)化(hua)性(xing)質(zhi)(zhi)(zhi),其(qi)密度(du)為(wei)1.13~1.19g/mL,由平均厚度(du)小(xiao)于(yu)5nm的(de)雙層脂(zhi)(zhi)(zhi)膜所包裹,具(ju)有(you)(you)典型杯(bei)狀形態,呈(cheng)現為(wei)扁平球形。外(wai)泌(mi)(mi)(mi)(mi)體(ti)(ti)表面(mian)富(fu)含(han)多糖(tang)鏈,其(qi)質(zhi)(zhi)(zhi)膜主(zhu)要由溶血(xue)磷(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)酸(suan)、磷(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)酰(xian)絲氨酸(suan)、膽固醇、神經酰(xian)胺和(he)鞘磷(lin)脂(zhi)(zhi)(zhi)構成(cheng),另有(you)(you)與(yu)細胞(bao)(bao)來(lai)源(yuan)相關的(de)部(bu)分(fen)特(te)(te)殊脂(zhi)(zhi)(zhi)類。外(wai)泌(mi)(mi)(mi)(mi)體(ti)(ti)可攜帶蛋(dan)(dan)白質(zhi)(zhi)(zhi)、核酸(suan)和(he)脂(zhi)(zhi)(zhi)質(zhi)(zhi)(zhi)等(deng)(deng)生(sheng)物(wu)活性(xing)大(da)分(fen)子,其(qi)中主(zhu)要為(wei)蛋(dan)(dan)白質(zhi)(zhi)(zhi),且大(da)部(bu)分(fen)蛋(dan)(dan)白為(wei)所有(you)(you)來(lai)源(yuan)外(wai)泌(mi)(mi)(mi)(mi)體(ti)(ti)所共有(you)(you),只有(you)(you)小(xiao)部(bu)分(fen)與(yu)其(qi)來(lai)源(yuan)有(you)(you)關,為(wei)其(qi)分(fen)泌(mi)(mi)(mi)(mi)細胞(bao)(bao)的(de)特(te)(te)有(you)(you)蛋(dan)(dan)白,能夠反映分(fen)泌(mi)(mi)(mi)(mi)細胞(bao)(bao)的(de)類型和(he)生(sheng)理(li)病理(li)狀態。除此之外(wai),外(wai)泌(mi)(mi)(mi)(mi)體(ti)(ti)可攜帶大(da)量mRNA和(he)miRNA等(deng)(deng)核酸(suan),并將其(qi)運輸到靶細胞(bao)(bao),發揮(hui)相應(ying)的(de)生(sheng)物(wu)學功能。外(wai)泌(mi)(mi)(mi)(mi)體(ti)(ti)可以作為(wei)藥(yao)物(wu)治(zhi)理(li)的(de)遞送(song)系統。山東海洋生(sheng)物(wu)外(wai)泌(mi)(mi)(mi)(mi)體(ti)(ti)

建立(li)記錄各論文(wen)實驗(yan)條(tiao)件的數(shu)據庫也可(ke)作(zuo)為規避混(hun)亂的方(fang)法之一(yi)。外(wai)泌體nta檢測

外(wai)(wai)(wai)(wai)泌體(ti)(ti)運(yun)輸(shu)的(de)(de)(de)(de)(de)基因(yin)類(lei)藥物(wu)也(ye)(ye)可以(yi)(yi)是miRNA,miRNA是一類(lei)非(fei)編碼的(de)(de)(de)(de)(de)內源性RNA,主(zhu)要(yao)(yao)用(yong)于調節轉錄后的(de)(de)(de)(de)(de)基因(yin)表(biao)(biao)達。miRNA主(zhu)要(yao)(yao)通過(guo)與mRNA的(de)(de)(de)(de)(de)未(wei)翻譯的(de)(de)(de)(de)(de)區域(yu)(UTRs)結合起到抑制基因(yin)表(biao)(biao)達和降解mRNA的(de)(de)(de)(de)(de)作用(yong)。與siRNA不(bu)(bu)同,miRNA抑制mRNA的(de)(de)(de)(de)(de)表(biao)(biao)達不(bu)(bu)需要(yao)(yao)完美的(de)(de)(de)(de)(de)堿(jian)基配對,因(yin)此(ci)每種miRNA可以(yi)(yi)抑制多種蛋(dan)白質的(de)(de)(de)(de)(de)表(biao)(biao)達,而(er)每種siRNA只針對一種蛋(dan)白質。miRNA的(de)(de)(de)(de)(de)運(yun)載(zai)也(ye)(ye)存(cun)在著(zhu)種種挑戰:miRNA體(ti)(ti)內穩定性差(cha)、生物(wu)分(fen)布不(bu)(bu)理想、易被(bei)體(ti)(ti)內酶降解以(yi)(yi)及(ji)容易引(yin)起副反應等。越(yue)來越(yue)多的(de)(de)(de)(de)(de)研(yan)究表(biao)(biao)明外(wai)(wai)(wai)(wai)泌體(ti)(ti)也(ye)(ye)是體(ti)(ti)內運(yun)載(zai)miRNA的(de)(de)(de)(de)(de)優良載(zai)體(ti)(ti),并且利用(yong)外(wai)(wai)(wai)(wai)泌體(ti)(ti)運(yun)輸(shu)miRNA的(de)(de)(de)(de)(de)zhiliao方法已(yi)經在許多疾病模型中(zhong)得以(yi)(yi)應用(yong)。外(wai)(wai)(wai)(wai)泌體(ti)(ti)nta檢測

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